miR-125a-5p inhibits cancer stem cells phenotype and epithelial to mesenchymal transition in glioblastoma

SUMMARY OBJECTIVE Glioblastoma (GBM) is a common type of cancer with high mortality. Epithelial to mesenchymal transition (EMT) plays a vital role in the development of glioblastoma. The aim of this study is to evaluate the role of miR-125a-5p in glioblastoma and in the tumorigenesis of chemotherapeutic drug-resistant cancer stem-like cells in brain glioma. METHODS The role of miR-125a-5p in the regulation of CSCs, EMT, migration, and invasion in glioblastoma was measured in this study. RESULTS We showed the roles of miR-125a-5p in the regulation of CSCs, EMT, migration, and invasion in glioblastoma. miR-125a-5p can inhibit the CSCs phenotype and EMT in glioblastoma cells. In addition, its over-expression can significantly regulate CSCs-associated genes and EMT-associated gene expression in glioblastoma cells. CONCLUSIONS We concluded that miR-125a-5p is one of the key microRNAs regulating CSCs and EMT programs in glioblastoma. The results suggested that miR-125a-5p might be a novel therapy target for glioblastoma.

RESUMO OBJETIVO O glioblastoma (GBM) é um câncer comum e de alta mortalidade. A transição epitélio-mesênquima (EMT) desempenha um papel vital no desenvolvimento do glioblastoma. O objetivo deste estudo é avaliar o papel do miR-125a-5p no glioblastoma e a tumorigênese de células-troco cancerígenas resistentes a medicamentos quimioterápicos em gliomas cerebrais. METODOLOGIA Os papéis do miR-125a-5p na regulação de células-tronco cancerígenas, EMT, migração e invasão do glioblastoma foram medidos neste estudo. RESULTADOS Mostramos a função do miR-125a-5p na regulação das células-tronco cancerígenas, EMT, migração e invasão do glioblastoma. O miR-125a-5p pode inibir o fenótipo e a EMT de células-tronco cancerígenas em células de glioblastoma. Além disso, a sua superexpressão pode regular de forma significante genes associados às células-tronco cancerígenas e a expressão de genes associados à EMT em células de glioblastoma. CONCLUSÕES Concluímos que o miR-125a-5p é um dos principais microRNAs na regulação de células-tronco cancerígenas e programas de EMT em glioblastomas, e os resultados sugerem que o miR-125a-5p pode ser um novo alvo terapêutico em casos de glioblastoma.

HER2-expressing breast tumors are associated with breast cancer stem-cell phenotype CD44+/CD24- / Tumores de mama que superexpressam HER2 estão associados ao fenótipo de células-tronco tumorais CD44+/CD24-

ABSTRACT INTRODUCTION: According to the cancer stem-cell theory, tumors originate from a small population of cancer stem cells, which lose the mechanism of self-regulation and begin to differentiate and proliferate indefinitely. The CD44+/CD24- phenotype may be considered a stem-cell marker in breast cancer. OBJECTIVE: To evaluate the correlation between CD44+/CD24- phenotype and different molecular subtypes of breast cancer in invasive ductal carcinoma samples. METHODS: The expression of CD44, CD44v6, and CD24 markers was investigated in 133 cases of invasive mammary carcinoma with immunohistochemistry. CD44+/CD24- phenotype was identified and correlated with the molecular subtypes and classical prognostic factors such as age, histological grade, tumor size, and lymph node status. RESULTS: Eighteen (14%) cases were positive for CD44+/CD24- (CD44+/CD24- or CD44v6+/CD24-) phenotype; among these, 11.1%, 27.8%, 38.9%, and 22.2% were luminal, luminal B-human epidermal growth factor receptor 2 (HER2), HER2, and triple-negative subtype, respectively. CD44+/ CD24- phenotype was more common in HER2 subgroup (p = 0.0197). CONCLUSION: CD44+/CD24- phenotype was correlated with molecular subtypes of breast cancer. The highest expression of CD44+/CD24- phenotype was reported in patients with HER2+ disease, a molecular subtype associated with more aggressive behavior and worse prognosis.

RESUMO INTRODUÇÃO: De acordo com a teoria das células-tronco tumorais, os tumores são originários de uma pequena população de células-tronco que perdem o mecanismo de autorregulação e começam a se diferenciar e proliferar indefinidamente. O fenótipo CD44+/CD24- pode ser considerado um marcador de células-tronco tumorais no câncer de mama. OBJETIVO: Avaliar a correlação entre o fenótipo CD44+/CD24- e os diferentes subtipos moleculares do câncer de mama em amostras de carcinoma ductal invasor. MÉTODOS: A expressão dos marcadores CD44, CD44v6 e CD24 foi investigada em 133 casos de carcinoma mamário invasor por meio de imuno-histoquímica. O fenótipo CD44+/CD24- foi identificado e correlacionado com os subtipos moleculares e os fatores prognósticos clássicos, como idade, grau histológico, tamanho do tumor e status do linfonodo. RESULTADOS: Dezoito (14%) casos foram positivos para o fenótipo CD44+/CD24- (CD44+/CD24- ou CD44v6+/CD24-), sendo 11, 1%, 27, 8%, 38, 9% e 22, 2% dos subtipos luminal, luminal B-human epidermal growth factor receptor 2 (HER2), HER2 e triplo negativo, respectivamente. O fenótipo CD44+/CD24- foi mais comum no subgrupo HER2 (p = 0, 0197). CONCLUSÃO: O fenótipo CD44+/CD24- foi correlacionado com os subtipos moleculares do câncer de mama. A maior expressão do fenótipo CD44+/CD24- foi encontrada em pacientes com doença HER2+, subtipo molecular associado a um comportamento mais agressivo e a um pior prognóstico.

Cancer stem cells: a new approach to tumor development / Células-tronco de câncer: um nova abordagem do desenvolvimento tumoral

Many theories have been proposed to explain the origins of cancer. Currently, evidences show that not every tumor cell is capable of initiating a tumor. Only a small part of the cancer cells, called cancer stem cells (CSCs), can generate a tumor identical to the original one, when removed from human tumors and transplanted into immunosuppressed mice. The name given to these cells comes from the resemblance to normal stem cells, except for the fact that their ability to divide is infinite. These cells are also affected by their microenvironment. Many of the signaling pathways, such as Wnt, Notch and Hedgehog, are altered in this tumoral subpopulation, which also contributes to abnormal proliferation. Researchers have found several markers for CSCs; however, much remains to be studied, or perhaps a universal marker does not even exist, since they vary among tumor types and even from patient to patient. It was also found that cancer stem cells are resistant to radiotherapy and chemotherapy. This may explain the re-emergence of the disease, since they are not completely eliminated and minimal amounts of CSCs can repopulate a tumor. Once the diagnosis in the early stages greatly increases the chances of curing cancer, identifying CSCs in tumors is a goal for the development of more effective treatments. The objective of this article is to discuss the origin of cancer according to the theory of stem cell cancer, as well as its markers and therapies used for treatment.

Diversas teorias buscam explicar a origem do câncer. Atualmente, há evidências de que nem todas as células tumorais têm poder de iniciar um tumor. Apenas uma pequena parte das células cancerígenas, chamadas de células-tronco de câncer (do inglês cancer stem cells - CSC), é capaz de iniciar um tumor idêntico ao original quando retirada de tumores humanos e enxertada em camundongos imunossuprimidos. Essas células foram assim denominadas por suas semelhanças com células-tronco normais, exceto pelo fato de que sua capacidade de dividir-se é infinita. Essas células também recebem influência de seu microambiente. Várias vias de sinalização, como WNT, NOTCH e Hedgehog, estão alteradas nessa subpopulação tumoral, contribuindo também para a desregulação de sua proliferação. Pesquisadores descobriram vários marcadores para as CSC, porém ainda há muito a ser pesquisado, ou talvez nem exista um marcador universal, já que eles variam entre cada tipo de tumor e até de paciente para paciente. Foi constatado também que as CSC são resistentes à radioterapia e à quimioterapia, podendo explicar o reaparecimento da doença, visto que, além de não eliminá-la completamente, quantidades mínimas das CSC podem repovoar um tumor. Como o diagnóstico em estágios iniciais aumenta muito as chances de cura do câncer, a identificação das CSC em meio a um tumor é alvo para o desenvolvimento de tratamentos mais eficazes. O objetivo deste artigo é discutir a origem do câncer segundo a teoria das CSC, bem como seus marcadores e as terapias utilizadas em seu tratamento.

Carcinogênese mamária experimental induzida pelo 7, 12, dimetilbenz (A) antraceno (DMBA): caracterização histopatológica comparada e identificação imunoistoquímica de células-tronco neoplásicas (CTNs) / Breast cancer neoplastic stem cells histology compared Sprague Dawley rats 7, 12 dimetilbenz (A) antracene

O câncer de mama é a neoplasia maligna mais prevalente e a principal causa de óbito entre mulheres, no mundo. A despeito de avanços substanciais no entendimento da biologia da doença, nos métodos de detecção precoce, e em sua farmacoterapia, a sobrevida geral não se modificou significantemente nas últimas décadas. Portanto, pode se dizer que um dos deveres primordiais das Universidades Públicas engajadas com pesquisa básica e aplicadas consiste em contribuir para o desenvolvimento de novas estratégias de tratamento sistêmico desta neoplasia. Nesse contexto, um dos alvos estratégicos mais promissores no desenvolvimento de novos fármacos antineoplásicos é representado pela célula-tronco neoplásica (CTN). As CTNs têm sido associadas em inúmeros estudos à capacidade de algumas neoplasias malignas de resistir às principais modalidades terapêuticas antineoplásicas, especialmente à: radio-, quimio-, hormônio- e imunoterapias. Em resumo, na atualidade, a detecção de CTNs constitui uma ferramenta clínica bastante promissora enquanto alvo terapêutico, fator prognóstico e preditivo de resposta terapêutica. O objetivo deste trabalho foi descrever e discutir as potencialidades e limitações do modelo de carcinogênese mamária pelo DMBA, após reclassificação das neoplasias mamárias segundo os critérios diagnósticos da OMS (2003, 2012), subtipagem molecular e quantificação de imunomarcadores prognósticos, preditivos e de CTN. Após a aplicação do protocolo experimental de indução química pelo DMBA e a eutanásia dos animais controle e experimental, suas linhas mamárias (contendo ou não tumores) foram ressecadas e avaliadas quanto à morfologia e a imunoexpressão para marcadores de CTNs. Após 13 semanas, 100% dos animais desenvolveram neoplasias macroscópicas e histologicamente compatíveis com os critérios de avaliação indicados pela OMS.

Breast cancer is the most common malignancy and the leading cause of death from cancer among females worldwide. Despite all the research and all the progress, methods of early detection, and its pharmacotherapy, overall survival has not changed significantly in recent decades. Therefore, the Public University has been engaged in basic and applied research is too contributed to the development of new strategies for systemic treatment of this malignancy. In this context, one of the most promising strategic targets in the development of the anticancer drugs is represented by neoplastic stem cell (NSC). Neoplastic stem cell has been linked in various studies to the capacity of some malignancies to resist major antineoplastic therapeutic modalities, especially: radio-, chemo-, hormone- and immunotherapies. In summary, the detection of NSCs is a clinical tool very promising while therapeutic target and prognostic factor predictive of therapeutic response. The aim of this study was to describe and discuss the strengths and limitations of the model of mammary carcinogenesis by DMBA, after reclassification of breast cancer according to the diagnostic criteria of the WHO (2003, 2012), and quantification of molecular subtyping prognostic immunomarkers, predictive and NSC. After application of the experimental protocol of chemical induction by DMBA and euthanasia of experimental and control animals, the mammary lines (with or without tumors) were resected and evaluated the morphology and immunostaining for markers of NSCs. After 13 weeks, 100% of the animals developed macroscopic neoplasms and histologically consistent with the evaluation criteria of evaluation indicated by WHO. Tumors were classified as ductal carcinoma, papillary carcinoma, lobular carcinoma, myoepithelial carcinoma and phyllodes tumor, being the most common type, the ductal. Few immunohistochemical markers correlated with variable behavior biological.

Isolation, cultivation and characterization of CD133+ stem cells from human glioblastoma / Isolamento, cultivo e caracterização de células-tronco CD133+ de glioblastoma humano

Objetivo: Estabelecer o método de isolamento e cultivo das neuroesferas de glioblastoma humano, bem como purificação de suas células-tronco, seguido do processo de obtenção de subesferas tumorais, caracterizando imunofenotipicamente esse conjunto clonogênico. Métodos: Por meio do processamento de amostras de glioblastomas (n=3), cumpriu-se a seguinte estratégia de ação: (i) estabelecimento da cultura primária de glioblastoma; (ii) isolamento e cultura de neuroesferas tumorais; (iii) purificação das células que iniciam os tumores (CD133+) por sistema de separação magnética (MACS); (iv) obtenção subesferas tumorais; (v) estudo da expressão de marcadores GFAP, CD133 e nestina. Resultados: Este estudo descreveu com sucesso o processo de isolamento e cultivo de subesferas de glioblastoma, as quais são constituídas por um conjunto clonogênico de células caracterizadas imunofenotipicamente como neurais, capazes de iniciar a formação tumoral. Conclusão: Estes achados poderão contribuir para a compreensão do processo de gliomagênese.